Muito bem, malta! Está na hora de partilhar alguns conhecimentos convosco. Vou descrever uma síntese que fiz da psilocina, completa com fotografias. Utilizei a psilocina produzida e desenvolvi um adesivo simples. Para testar a permeação da psilocina no adesivo, utilizámos um aparelho de difusão que montei. Envolve várias membranas, com um adesivo de 1 cm^2 colocado em cima de um pedaço de pele humana fresca de 1 cm^2 com 400 um de espessura (doada por um centro cirúrgico de abdominoplastia). Por baixo da pele, há um fluxo constante de água com pH 7,4 e à temperatura do corpo. O aparelho de difusão é capaz de recolher uma fração de 1 ml por hora, que é depois analisada por LC-MS. A quantidade de psilocina no frasco de 1mL dará o fluxo (mg/hr/cm^2). Isto determina a quantidade de psilocina que passa por hora com um tamanho de penso de cm^2.
A publicação seguinte, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Elucidação da estrutura e análise espectroscópica de cromóforos produzidos por dimerização oxidativa da psilocina), aborda a questão. Quando o dímero se forma, é indetetável através da análise por HPLC e ATR-FTIR, o que é estranho. Isto dá aos grupos de investigação falsos positivos para a pureza da psilocina. Encontrei uma maneira de estabilizar a psilocina no adesivo.
De qualquer forma, vamos começar! Fiz todos os passos sozinho, com a ajuda do meu parceiro que é engenheiro químico. Isto foi no tempo em que eu tinha uma licença DEA de schedule1 e 3 não só para investigação, mas também para fabrico.
Parte I (Síntese da Psilocina)
passo 1: síntese do Acetato de 3-[2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilo
1a. Um balão de 2000 mL, de quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de 250 mL e um septo de borracha através do qual foi introduzida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi removido e o balão foi carregado equitativamente com acetato de 1H-indol-4-ilo (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 equiv)
e Et2O anidro (700 mL). O balão foi novamente selado com o septo e é lavado com N2. A suspensão foi agitada durante 10 minutos e depois
arrefecida a 0 °C num banho de água gelada durante 30 min.
1b. O funil de gotejamento foi carregado com uma solução de cloreto de oxalilo (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 equiv) em Et2O (60 mL). A solução de cloreto de oxalilo foi adicionada gota a gota a uma taxa suficiente para manter a temperatura igual ou inferior a 5 °C, para minimizar a formação de dímeros e outros possíveis subprodutos. À medida que a adição progredia, formou-se uma pasta amarela de 10 e, quando a adição foi concluída, a mistura foi agitada durante 4 h.
1c. Após este período, foi adicionado heptano (400 mL) e a mistura foi agitada durante 30 min a 0 °C. O sólido amarelo obtido foi rapidamente filtrado e lavado sucessivamente com heptano (2 × 300 mL), que foi rapidamente utilizado na etapa seguinte. . Uma solução 2,0 M de dimetilamina em THF (175 mL) foi adicionada gota a gota a uma taxa suficiente para manter a temperatura abaixo de 5 ° C, a fim de minimizar as reações colaterais. Após a adição
Após a adição estar completa, adicionou-se gota a gota piridina (46 mL) em THF (100 mL) e a mistura foi bem agitada durante 60 min. Adicionou-se heptano (600 mL) e o conteúdo do balão foi filtrado por sucção através de um funil de Büchner. O resíduo filtrado foi transferido para um balão de fundo redondo e adicionou-se H2O desionizada (1000 mL), agitou-se durante 30 min e filtrou-se através de um funil de Büchner. O sólido esbranquiçado foi triturado sequencialmente durante 40 minutos em EtOAc (600 mL) e heptano (400mL). A lama foi filtrada através do funil de Büchner e o sólido foi seco numa estufa a 40 °C durante a noite para obter 6 como um sólido amarelo claro; rendimento: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
O ATR-FTIR confirmou a síntese do Acetato de 3-[2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilo. Este composto pode ser armazenado a 4C durante vários meses!
Etapa 2: Síntese da psilocina
Passo 2A: Um balão de 2000 mL, de quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de gotejamento de
funil de 250 mL e um septo de borracha através do qual foi introduzida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi retirado e o balão
O septo foi removido e o balão carregado sequencialmente com acetato de 3-[2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilo (6; 31,5 g, 115 mmol) e 2-CH3-THF (1000
mL). O balão foi imerso num banho de gelo a 0 °C e uma solução de 2,3 M LiAlH4 em 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) foi adicionada através do funil de queda de 250 mL.
do funil de 250 mL. A ampola de decantação foi lavada com mais 2-CH3-THF (20 mL). A solução de LiAlH4 foi adicionada gota a gota
a uma taxa para manter uma temperatura inferior a 20 °C. Após a adição, o banho de água gelada foi removido e a mistura agitada durante 30 minutos.
A solução amarelo-clara foi aquecida até ao refluxo (80 °C) com uma manta de aquecimento e tornou-se cor de marfim após 3 h. Observou-se a acumulação de
Observou-se a acumulação de sólidos amarelos nos lados do balão de fundo redondo
Etapa 2C. Retirar a manta de aquecimento e deixar arrefecer o balão até 50 °C. O balão foi novamente
arrefecido até 20 °C. A reação foi extinta por adição sequencial de 3 gotas de NaOH 1 M aq e 3 gotas de H2O desionizada. A mistura
foi diluída com THF (500 mL) e agitada durante 20 min. A mistura foi filtrada através de um funil de Büchner e o filtrado foi mantido sob N2.
O bolo de filtração foi rapidamente lavado com 200 mL de [solução a 10% de (7% de amoníaco em MeOH) em CH2Cl2] e THF (500 mL). Os filtrados
Os filtrados foram então combinados e concentrados para dar um sólido verde. O sólido foi triturado com EtOAc/heptano 1:1 (50 mL) e depois filtrado através de um funil de Büchner.
funil de Büchner. O sólido verde escuro foi seco numa estufa a 40 °C durante a noite para obter psilocina seca (7) como um sólido verde escuro; rendimento: 20,7
g (91%); p.f. 167-169 °C.
A psilocina foi sintetizada.
Parte II: Desenvolvimento do penso transdérmico de psilocina e estudo in-vitro (CUIDADO: VERÁ PELE HUMANA FRESCA, É GROSSA)
Em seguida, dissolvo a psilocina numa mistura patenteada de polímero de acrilato (em heptano), depois coloco a solução numa linha de libertação e utilizo uma faca de fundição para obter uma camada adesiva de 100 um. Uma vez seca, aplico a camada de suporte e perfuro um penso de 1 cm^2. Este adesivo é utilizado para o estudo in vitro.
A fotografia seguinte é uma imagem do aparelho de difusão (penso em cima da pele com água a correr por baixo)
Espero que tenham gostado!
A publicação seguinte, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Elucidação da estrutura e análise espectroscópica de cromóforos produzidos por dimerização oxidativa da psilocina), aborda a questão. Quando o dímero se forma, é indetetável através da análise por HPLC e ATR-FTIR, o que é estranho. Isto dá aos grupos de investigação falsos positivos para a pureza da psilocina. Encontrei uma maneira de estabilizar a psilocina no adesivo.
De qualquer forma, vamos começar! Fiz todos os passos sozinho, com a ajuda do meu parceiro que é engenheiro químico. Isto foi no tempo em que eu tinha uma licença DEA de schedule1 e 3 não só para investigação, mas também para fabrico.
Parte I (Síntese da Psilocina)
passo 1: síntese do Acetato de 3-[2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilo
1a. Um balão de 2000 mL, de quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de 250 mL e um septo de borracha através do qual foi introduzida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi removido e o balão foi carregado equitativamente com acetato de 1H-indol-4-ilo (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 equiv)
e Et2O anidro (700 mL). O balão foi novamente selado com o septo e é lavado com N2. A suspensão foi agitada durante 10 minutos e depois
arrefecida a 0 °C num banho de água gelada durante 30 min.
1b. O funil de gotejamento foi carregado com uma solução de cloreto de oxalilo (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 equiv) em Et2O (60 mL). A solução de cloreto de oxalilo foi adicionada gota a gota a uma taxa suficiente para manter a temperatura igual ou inferior a 5 °C, para minimizar a formação de dímeros e outros possíveis subprodutos. À medida que a adição progredia, formou-se uma pasta amarela de 10 e, quando a adição foi concluída, a mistura foi agitada durante 4 h.
1c. Após este período, foi adicionado heptano (400 mL) e a mistura foi agitada durante 30 min a 0 °C. O sólido amarelo obtido foi rapidamente filtrado e lavado sucessivamente com heptano (2 × 300 mL), que foi rapidamente utilizado na etapa seguinte. . Uma solução 2,0 M de dimetilamina em THF (175 mL) foi adicionada gota a gota a uma taxa suficiente para manter a temperatura abaixo de 5 ° C, a fim de minimizar as reações colaterais. Após a adição
Após a adição estar completa, adicionou-se gota a gota piridina (46 mL) em THF (100 mL) e a mistura foi bem agitada durante 60 min. Adicionou-se heptano (600 mL) e o conteúdo do balão foi filtrado por sucção através de um funil de Büchner. O resíduo filtrado foi transferido para um balão de fundo redondo e adicionou-se H2O desionizada (1000 mL), agitou-se durante 30 min e filtrou-se através de um funil de Büchner. O sólido esbranquiçado foi triturado sequencialmente durante 40 minutos em EtOAc (600 mL) e heptano (400mL). A lama foi filtrada através do funil de Büchner e o sólido foi seco numa estufa a 40 °C durante a noite para obter 6 como um sólido amarelo claro; rendimento: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
O ATR-FTIR confirmou a síntese do Acetato de 3-[2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilo. Este composto pode ser armazenado a 4C durante vários meses!
Etapa 2: Síntese da psilocina
Passo 2A: Um balão de 2000 mL, de quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de gotejamento de
funil de 250 mL e um septo de borracha através do qual foi introduzida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi retirado e o balão
O septo foi removido e o balão carregado sequencialmente com acetato de 3-[2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilo (6; 31,5 g, 115 mmol) e 2-CH3-THF (1000
mL). O balão foi imerso num banho de gelo a 0 °C e uma solução de 2,3 M LiAlH4 em 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) foi adicionada através do funil de queda de 250 mL.
do funil de 250 mL. A ampola de decantação foi lavada com mais 2-CH3-THF (20 mL). A solução de LiAlH4 foi adicionada gota a gota
a uma taxa para manter uma temperatura inferior a 20 °C. Após a adição, o banho de água gelada foi removido e a mistura agitada durante 30 minutos.
A solução amarelo-clara foi aquecida até ao refluxo (80 °C) com uma manta de aquecimento e tornou-se cor de marfim após 3 h. Observou-se a acumulação de
Observou-se a acumulação de sólidos amarelos nos lados do balão de fundo redondo
Etapa 2C. Retirar a manta de aquecimento e deixar arrefecer o balão até 50 °C. O balão foi novamente
arrefecido até 20 °C. A reação foi extinta por adição sequencial de 3 gotas de NaOH 1 M aq e 3 gotas de H2O desionizada. A mistura
foi diluída com THF (500 mL) e agitada durante 20 min. A mistura foi filtrada através de um funil de Büchner e o filtrado foi mantido sob N2.
O bolo de filtração foi rapidamente lavado com 200 mL de [solução a 10% de (7% de amoníaco em MeOH) em CH2Cl2] e THF (500 mL). Os filtrados
Os filtrados foram então combinados e concentrados para dar um sólido verde. O sólido foi triturado com EtOAc/heptano 1:1 (50 mL) e depois filtrado através de um funil de Büchner.
funil de Büchner. O sólido verde escuro foi seco numa estufa a 40 °C durante a noite para obter psilocina seca (7) como um sólido verde escuro; rendimento: 20,7
g (91%); p.f. 167-169 °C.
A psilocina foi sintetizada.
Parte II: Desenvolvimento do penso transdérmico de psilocina e estudo in-vitro (CUIDADO: VERÁ PELE HUMANA FRESCA, É GROSSA)
Em seguida, dissolvo a psilocina numa mistura patenteada de polímero de acrilato (em heptano), depois coloco a solução numa linha de libertação e utilizo uma faca de fundição para obter uma camada adesiva de 100 um. Uma vez seca, aplico a camada de suporte e perfuro um penso de 1 cm^2. Este adesivo é utilizado para o estudo in vitro.
A fotografia seguinte é uma imagem do aparelho de difusão (penso em cima da pele com água a correr por baixo)
Espero que tenham gostado!
