Muito bem, pessoal! Chegou a hora de compartilhar algum conhecimento com vocês. Descreverei uma síntese que fiz para a psilocina, completa com fotos. Usei a psilocina produzida e desenvolvi um adesivo simples. Para testar a permeação da psilocina no adesivo, utilizamos um aparelho de difusão que montei. Ele envolve várias membranas, com um adesivo de 1 cm^2 colocado sobre um pedaço de pele humana fresca de 1 cm^2 com espessura de 400 um (doado por um centro cirúrgico de abdominoplastia). Abaixo da pele, há um fluxo constante de água com pH 7,4 e temperatura corporal. O aparelho de difusão é capaz de coletar uma fração de 1 ml por hora, que é então analisada por LC-MS. A quantidade de psilocina no frasco de 1 ml fornecerá o fluxo (mg/hr/cm^2). Isso determina a quantidade de psilocina que passa por hora com um tamanho de adesivo de cm^2.
A publicação a seguir, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Elucidação da estrutura e análise espectroscópica de cromóforos produzidos por dimerização oxidativa da psilocina), aborda a questão. Quando o dímero se forma, ele não é detectável por meio da análise de HPLC e ATR-FTIR, o que é estranho. Isso dá aos grupos de pesquisa falsos positivos para a pureza da psilocina. Descobri uma maneira de estabilizar a psilocina no adesivo.
De qualquer forma, vamos começar! Realizei todas as etapas sozinho, com a ajuda do meu parceiro, que é engenheiro químico. Isso foi na época em que eu tinha uma licença DEA Schedule 1 e 3, não apenas para pesquisa, mas também para fabricação.
Parte I (síntese da psilocina)
etapa 1: síntese do acetato de 3-[2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ila
1a. Um balão de 2000 mL, com quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de gotejamento de 250 mL e um septo de borracha pelo qual foi inserida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi removido e o frasco foi carregado equitativamente com acetato de 1H-indol-4-ila (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 equiv)
e Et2O anidro (700 mL). O frasco foi vedado novamente com o septo e lavado com N2. A suspensão foi agitada por 10 minutos e, em seguida
resfriada a 0 °C em um banho de água gelada por 30 minutos.
1b. O funil de gotejamento foi carregado com uma solução de cloreto de oxalila (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 equiv) em Et2O (60 mL). A solução de cloreto de oxalila foi adicionada gota a gota em uma taxa suficiente para manter a temperatura igual ou inferior a 5 °C, para minimizar a formação de dímero e outros possíveis subprodutos. À medida que a adição avançava, formou-se uma pasta amarela de 10 e, quando a adição foi concluída, a mistura foi agitada por 4 h.
1c. Após esse período, foi adicionado heptano (400 mL) e a mistura foi agitada por 30 minutos a 0 °C. O sólido amarelo obtido foi rapidamente filtrado e lavado sucessivamente com heptano (2 × 300 mL), que foi rapidamente usado na próxima etapa. . Uma solução 2,0 M de dimetilamina em THF (175 mL) foi adicionada gota a gota em uma taxa suficiente para manter a temperatura abaixo de 5 °C, a fim de minimizar as reações colaterais. Depois que a
Após o término da adição, piridina (46 mL) em THF (100 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura foi bem agitada por 60 minutos. Foi adicionado heptano (600 mL) e o conteúdo do frasco foi filtrado por sucção em um funil de Büchner. O resíduo filtrado foi transferido para um balão de fundo redondo e H2O deionizada (1000 mL) foi adicionada, agitada por 30 minutos e filtrada por meio de um funil de Büchner. O sólido esbranquiçado foi triturado sequencialmente por 40 minutos em EtOAc (600 mL) e heptano (400 mL). A pasta foi filtrada por meio de um funil de Büchner e o sólido foi seco em um forno a 40 °C durante a noite para obter 6 como um sólido amarelo-claro; rendimento: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
O ATR-FTIR confirmou a síntese do Acetato de 3-[2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ila. Esse composto pode ser armazenado a 4C por vários meses!
Etapa 2: Síntese da psilocina
Etapa 2A: Um balão de 2000 mL, com quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de
funil de gotejamento de 250 ml e um septo de borracha através do qual foi inserida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi removido e o frasco
O septo foi removido e o frasco carregado sequencialmente com acetato de 3-[2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ila (6; 31,5 g, 115 mmol) e 2-CH3-THF (1000
mL). O frasco foi imerso em um banho de gelo a 0 °C e uma solução de 2,3 M de LiAlH4 em 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) foi adicionada através do funil de gotejamento de 250 mL.
pelo funil de gotejamento de 250 mL. O funil de gotejamento foi lavado com mais 2-CH3-THF (20 mL). A solução de LiAlH4 foi adicionada gota a gota
em uma taxa para manter uma temperatura abaixo de 20 °C. Após a adição, o banho de água gelada foi removido e a mistura foi agitada por 30 minutos.
A solução amarelo-clara foi aquecida até o refluxo (80 °C) com um manto de aquecimento e tornou-se cor de marfim após 3 h. O acúmulo de sólidos amarelos foi observado nas laterais da solução.
O acúmulo de sólidos amarelos foi observado nas laterais do frasco de fundo redondo
Etapa 2C. A manta de aquecimento foi removida e o frasco foi deixado esfriar até 50 °C. O frasco foi novamente
resfriado a 20 °C. A reação foi extinta pela adição sequencial de 3 gotas de NaOH aq 1 M e 3 gotas de H2O deionizada. A mistura
A mistura foi diluída com THF (500 mL) e agitada por 20 minutos. A mistura foi filtrada por meio de um funil de Büchner e o filtrado foi mantido sob N2.
A torta de filtro foi rapidamente ressuspendida com 200 mL de [solução a 10% de (7% de amônia em MeOH) em CH2Cl2] e THF (500 mL). Os filtrados
Os filtrados foram então combinados e concentrados para produzir um sólido verde. O sólido foi triturado com EtOAc/heptano 1:1 (50 mL) e, em seguida, filtrado em um funil de Büchner.
funil de Büchner. O sólido verde-escuro foi seco em um forno a 40 °C durante a noite para fornecer psilocina seca (7) como um sólido verde-escuro; rendimento: 20,7
g (91%); p.f. 167-169 °C.
A psilocina foi sintetizada.
Parte II: Desenvolvimento do adesivo transdérmico de psilocina e estudo in vitro (CUIDADO: VOCÊ VERÁ PELE HUMANA FRESCA, SUA GROSSA
Em seguida, dissolvo a psilocina em uma mistura patenteada de polímero de acrilato (em heptano). Depois, coloco a solução em uma linha de liberação e uso uma faca de fundição para obter uma camada adesiva de 100 um. Depois de seco, aplico a camada de suporte e perfuro um adesivo de 1 cm^2. Esse adesivo é usado para o estudo in vitro.
A foto a seguir é um instantâneo do aparato de difusão (adesivo em cima da pele com água correndo embaixo)
Espero que você tenha gostado!
A publicação a seguir, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Elucidação da estrutura e análise espectroscópica de cromóforos produzidos por dimerização oxidativa da psilocina), aborda a questão. Quando o dímero se forma, ele não é detectável por meio da análise de HPLC e ATR-FTIR, o que é estranho. Isso dá aos grupos de pesquisa falsos positivos para a pureza da psilocina. Descobri uma maneira de estabilizar a psilocina no adesivo.
De qualquer forma, vamos começar! Realizei todas as etapas sozinho, com a ajuda do meu parceiro, que é engenheiro químico. Isso foi na época em que eu tinha uma licença DEA Schedule 1 e 3, não apenas para pesquisa, mas também para fabricação.
Parte I (síntese da psilocina)
etapa 1: síntese do acetato de 3-[2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ila
1a. Um balão de 2000 mL, com quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de gotejamento de 250 mL e um septo de borracha pelo qual foi inserida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi removido e o frasco foi carregado equitativamente com acetato de 1H-indol-4-ila (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 equiv)
e Et2O anidro (700 mL). O frasco foi vedado novamente com o septo e lavado com N2. A suspensão foi agitada por 10 minutos e, em seguida
resfriada a 0 °C em um banho de água gelada por 30 minutos.
1b. O funil de gotejamento foi carregado com uma solução de cloreto de oxalila (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 equiv) em Et2O (60 mL). A solução de cloreto de oxalila foi adicionada gota a gota em uma taxa suficiente para manter a temperatura igual ou inferior a 5 °C, para minimizar a formação de dímero e outros possíveis subprodutos. À medida que a adição avançava, formou-se uma pasta amarela de 10 e, quando a adição foi concluída, a mistura foi agitada por 4 h.
1c. Após esse período, foi adicionado heptano (400 mL) e a mistura foi agitada por 30 minutos a 0 °C. O sólido amarelo obtido foi rapidamente filtrado e lavado sucessivamente com heptano (2 × 300 mL), que foi rapidamente usado na próxima etapa. . Uma solução 2,0 M de dimetilamina em THF (175 mL) foi adicionada gota a gota em uma taxa suficiente para manter a temperatura abaixo de 5 °C, a fim de minimizar as reações colaterais. Depois que a
Após o término da adição, piridina (46 mL) em THF (100 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura foi bem agitada por 60 minutos. Foi adicionado heptano (600 mL) e o conteúdo do frasco foi filtrado por sucção em um funil de Büchner. O resíduo filtrado foi transferido para um balão de fundo redondo e H2O deionizada (1000 mL) foi adicionada, agitada por 30 minutos e filtrada por meio de um funil de Büchner. O sólido esbranquiçado foi triturado sequencialmente por 40 minutos em EtOAc (600 mL) e heptano (400 mL). A pasta foi filtrada por meio de um funil de Büchner e o sólido foi seco em um forno a 40 °C durante a noite para obter 6 como um sólido amarelo-claro; rendimento: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
O ATR-FTIR confirmou a síntese do Acetato de 3-[2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ila. Esse composto pode ser armazenado a 4C por vários meses!
Etapa 2: Síntese da psilocina
Etapa 2A: Um balão de 2000 mL, com quatro gargalos e fundo redondo, foi equipado com um agitador suspenso, um controlador de temperatura J-Kem, um funil de
funil de gotejamento de 250 ml e um septo de borracha através do qual foi inserida uma pressão positiva de N2 seco. O septo foi removido e o frasco
O septo foi removido e o frasco carregado sequencialmente com acetato de 3-[2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ila (6; 31,5 g, 115 mmol) e 2-CH3-THF (1000
mL). O frasco foi imerso em um banho de gelo a 0 °C e uma solução de 2,3 M de LiAlH4 em 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) foi adicionada através do funil de gotejamento de 250 mL.
pelo funil de gotejamento de 250 mL. O funil de gotejamento foi lavado com mais 2-CH3-THF (20 mL). A solução de LiAlH4 foi adicionada gota a gota
em uma taxa para manter uma temperatura abaixo de 20 °C. Após a adição, o banho de água gelada foi removido e a mistura foi agitada por 30 minutos.
A solução amarelo-clara foi aquecida até o refluxo (80 °C) com um manto de aquecimento e tornou-se cor de marfim após 3 h. O acúmulo de sólidos amarelos foi observado nas laterais da solução.
O acúmulo de sólidos amarelos foi observado nas laterais do frasco de fundo redondo
Etapa 2C. A manta de aquecimento foi removida e o frasco foi deixado esfriar até 50 °C. O frasco foi novamente
resfriado a 20 °C. A reação foi extinta pela adição sequencial de 3 gotas de NaOH aq 1 M e 3 gotas de H2O deionizada. A mistura
A mistura foi diluída com THF (500 mL) e agitada por 20 minutos. A mistura foi filtrada por meio de um funil de Büchner e o filtrado foi mantido sob N2.
A torta de filtro foi rapidamente ressuspendida com 200 mL de [solução a 10% de (7% de amônia em MeOH) em CH2Cl2] e THF (500 mL). Os filtrados
Os filtrados foram então combinados e concentrados para produzir um sólido verde. O sólido foi triturado com EtOAc/heptano 1:1 (50 mL) e, em seguida, filtrado em um funil de Büchner.
funil de Büchner. O sólido verde-escuro foi seco em um forno a 40 °C durante a noite para fornecer psilocina seca (7) como um sólido verde-escuro; rendimento: 20,7
g (91%); p.f. 167-169 °C.
A psilocina foi sintetizada.
Parte II: Desenvolvimento do adesivo transdérmico de psilocina e estudo in vitro (CUIDADO: VOCÊ VERÁ PELE HUMANA FRESCA, SUA GROSSA
Em seguida, dissolvo a psilocina em uma mistura patenteada de polímero de acrilato (em heptano). Depois, coloco a solução em uma linha de liberação e uso uma faca de fundição para obter uma camada adesiva de 100 um. Depois de seco, aplico a camada de suporte e perfuro um adesivo de 1 cm^2. Esse adesivo é usado para o estudo in vitro.
A foto a seguir é um instantâneo do aparato de difusão (adesivo em cima da pele com água correndo embaixo)
Espero que você tenha gostado!
