Indolo 3 laktato papildų poveikis išsėtinės sklerozės gyvūnų modeliams
Pradedu nuo nulio, turėdamas pagrindinius krūmų mechanikos įgūdžius.
Nėra daug dalykų, kurių negalėčiau padaryti turėdamas pakankamai laiko, tačiau tokia yra degeneracinių ligų problema.
Kaip žinote, sunku gauti informacijos iš medikų ar cheminių medžiagų tiekėjų.
Aš noriu gyventi.
Netvirtinu, kad tai vertinga, bet galbūt galite padėti man suprasti daugiau.
Geriausia, ką kol kas turiu, randu cheminių medžiagų tiekėjų svetainėse esančiuose duomenyse:
Kaip paruošti pradinį tirpalą?
Pagal eksperimento reikalavimus pasirinkite tinkamą tirpiklį koncentruotam pradiniam tirpalui paruošti. Informaciją apie tirpumą rasite mūsų svetainės produkto puslapyje. In vitro eksperimentams kaip tirpiklis dažnai naudojamas DMSO.
Tuomet pradinis tirpalas skiedžiamas darbiniam tirpalui pagaminti (pvz., 1:1000 skiedimas ląstelių kultūros terpėje).
Čia pateikiamos kelios produkto tirpinimo rekomendacijos:
(1) Perskaičiuokite pradinio tirpalo koncentraciją pagal šią formulę: Faktinė koncentracija (mg/ml) = molekulinė masė (g/mol) x koncentracija (mM) x 10-3
(2) Patikrinkite, ar tirpiklis nebuvo užterštas, pavyzdžiui, DMSO sugeria drėgmę.
(3) Kai kuriuos junginius dėl jų struktūros ir cheminių savybių sunku ištirpinti, todėl gali prireikti papildomo maišymo, pavyzdžiui, sūkuriavimo arba ultragarso. Prireikus tirpinimo procesą taip pat gali palengvinti junginio kaitinimas. Tačiau nepamirškite, kad junginio negalima kaitinti daugiau kaip 45 ℃, kad nepakistų produktas.
Kaip laikyti produktą?
Laikyti -20 ℃ arba -80 ℃ Alikvotinį pradinį tirpalą paskirstykite iki įprastinio naudojimo kiekio ir laikykite -20 ℃ arba -80 ℃ temperatūroje. Venkite pakartotinio užšaldymo ir atšildymo.
Kaip paruošti darbinį tirpalą?
(1) Apskaičiuokite reikiamą praskiedimą naudodami mūsų skiedimo skaičiuoklę.
(2) Lėtai įpilkite pradinį tirpalą į tirpiklį, kol gausite reikiamą koncentraciją.
Maišykite sukdami sūkuriais arba pakartotinai pipetuodami.
(3) Jei darbiniame tirpale yra nuosėdų, leiskite darbiniam tirpalui pastovėti 10 minučių, maišykite sūkuriniu judesiu arba pipete ir tada dar kartą patikrinkite.
(4) Mūsų junginiai dažniausiai tirpsta riebaluose. Gali būti nuosėdų, kai skiedžiama vandeniniais tirpikliais, tokiais kaip ląstelių kultūrų terpė arba PBS Visišką ištirpinimą galima pasiekti ultragarsu.
Į ką turėčiau atkreipti dėmesį atlikdamas ląstelinius tyrimus?
Daugumoje ląstelinių tyrimų pradiniam tirpalui paruošti naudojamas DMSO. Pirminis tirpalas skiedžiamas kultūros terpėje, kad būtų paruoštas darbinis tirpalas. Įsitikinkite, kad DMSO koncentracija yra <=0,1 %, kad išvengtumėte ląstelių apsinuodijimo Paprastai neigiama kontrolė eksperimente yra kultūrinė terpė su tokios pat koncentracijos DMSO.
Į ką turėčiau atkreipti dėmesį atlikdamas eksperimentus su gyvūnais?
(1) Mūsų junginiai dažniausiai tirpsta riebaluose. Jei DMSO naudojamas pagrindiniam tirpalui ruošti ir po to skiedžiamas darbiniam tirpalui ruošti eksperimentams su gyvūnais, gali nepavykti gauti reikiamų dozių. Vietoj to reikia hidrotropinių medžiagų, tokių kaip natrio karboksimetilceliuliozė (CMC-Na), Tween 80 arba glicerolis.
Pavyzdžiui, norint perskaičiuoti pelei naudojamą dozę(20m/kg) į 1,5 kg triušiui naudojamą dozę:
A grupės gyvūnas: pelė; B grupės gyvūnas: Triušis;
Perskaičiavimo koeficientas:
0,37 Triušiui naudojama dozė būtų 1,5 kg*(0,37*20mg/kg) =11,1 mg.
