Bene, ragazzi! È ora di condividere con voi un po' di conoscenza. Vi descriverò una sintesi che ho fatto della psilocina, corredata di foto. Ho utilizzato la psilocina prodotta e ho sviluppato un semplice cerotto adesivo. Per testare la permeazione della psilocina nel cerotto, abbiamo utilizzato un apparato di diffusione che ho messo insieme. Si tratta di diverse membrane, con un cerotto di 1 cm^2 posto sopra un pezzo di pelle umana fresca di 1 cm^2 con uno spessore di 400 um (donato da un centro chirurgico di addominoplastica). Sotto la pelle, c'è un flusso costante di acqua a pH 7,4 e a temperatura corporea. L'apparato di diffusione è in grado di raccogliere una frazione di 1 ml all'ora, che viene poi analizzata mediante LC-MS. La quantità di psilocina contenuta nella fiala da 1 ml fornisce il flusso (mg/ora/cm^2). Ciò indica la quantità di psilocina che passa all'ora con una dimensione del cerotto di cm^2.
La pubblicazione seguente, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization, approfondisce la questione. Quando il dimero si forma, non è rilevabile tramite analisi HPLC e ATR-FTIR, il che è strano. Questo dà ai gruppi di ricerca falsi positivi per la purezza della psilocina. Ho trovato un modo per stabilizzare la psilocina nel cerotto.
Comunque, cominciamo! Ho fatto ogni passo da solo, con l'assistenza del mio compagno che è un ingegnere chimico. Questo accadeva quando avevo una licenza DEA di tipo 1 e 3 non solo per la ricerca, ma anche per la produzione.
Parte I (sintesi della psilocina)
fase 1: sintesi del 3-[2-(Dimetilammino)-2-ossoacetil]-1H-indolo-4-il acetato
1a. Un pallone da 2000 mL, a quattro colli, a fondo tondo, è stato equipaggiato con un agitatore in testa, un regolatore di temperatura J-Kem, un imbuto di caduta da 250 mL e un setto di gomma attraverso il quale è stata inserita una pressione positiva di N2 secco. Il setto è stato rimosso e il matraccio è stato caricato equamente con 1H-indol-4-il acetato (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 equiv.)
e Et2O anidra (700 mL). Il matraccio è stato richiuso con il setto e lavato con N2. La sospensione è stata agitata per 10 minuti e poi
raffreddata a 0 °C in un bagno di acqua e ghiaccio per 30 minuti.
1b. L'imbuto di gocciolamento è stato caricato con una soluzione di cloruro di ossalile (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 equiv.) in Et2O (60 mL). La soluzione di cloruro di ossalile è stata aggiunta per caduta a una velocità sufficiente a mantenere la temperatura a 5 °C o inferiore, per minimizzare la formazione di dimeri e altri possibili sottoprodotti. Man mano che l'aggiunta procedeva, si formava uno slurry giallo di 10. Una volta completata l'aggiunta, la miscela è stata agitata per 4 ore.
1c. Dopo questo tempo, è stato aggiunto eptano (400 mL) e la miscela è stata agitata per 30 minuti a 0 °C. Il solido giallo ottenuto è stato rapidamente filtrato. Il solido giallo ottenuto è stato rapidamente filtrato e risciacquato successivamente con eptano (2 × 300 mL), che è stato rapidamente utilizzato nella fase successiva. . Una soluzione 2,0 M di dimetilammina in THF (175 mL) è stata aggiunta a goccia a goccia a una velocità sufficiente a mantenere la temperatura sotto i 5 °C per minimizzare le reazioni collaterali. Dopo che l'aggiunta è stata
aggiunta, è stata aggiunta a goccia a goccia piridina (46 mL) in THF (100 mL) e la miscela è stata agitata bene per 60 minuti. È stato aggiunto eptano (600 mL) e il contenuto del pallone è stato filtrato per aspirazione tramite un imbuto di Büchner. Il residuo filtrato è stato trasferito in un pallone a fondo tondo e aggiunto di H2O deionizzata (1000 mL), agitato per 30 min e filtrato tramite imbuto di Büchner. Il solido bianco sporco è stato triturato in sequenza per 40 min in EtOAc (600 mL) ed eptano (400mL). Lo slurry è stato filtrato tramite imbuto di Büchner e il solido è stato essiccato in forno a 40 °C per una notte per ottenere 6 come solido giallo chiaro; resa: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
L'ATR-FTIR ha confermato la sintesi del 3-[2-(Dimetilammino)-2-ossoacetil]-1H-indolo-4-il acetato. Questo composto può essere conservato a 4°C per diversi mesi!
Fase 2: Sintesi della psilocina
Fase 2A: Un pallone da 2000 mL, a quattro colli e a fondo tondo, è stato equipaggiato con un agitatore in testa, un regolatore di temperatura J-Kem, un imbuto di gocciolamento da 250 mL e una valvola di sicurezza.
250 mL e un setto di gomma attraverso il quale è stata inserita una pressione positiva di N2 secco. Il setto è stato rimosso e il
setto è stato rimosso e il matraccio è stato caricato in sequenza con acetato di 3-[2-(dimetilammino)-2-ossoacetil]-1H-indolo-4-il (6; 31,5 g, 115 mmol) e 2-CH3-THF (1000
mL). Il matraccio è stato immerso in un bagno di ghiaccio a 0 °C e una soluzione di 2,3 M di LiAlH4 in 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) è stata aggiunta attraverso l'imbuto gocciolatore da 250 mL.
l'imbuto di gocciolamento da 250 mL. L'imbuto di gocciolamento è stato risciacquato con ulteriore 2-CH3-THF (20 mL). La soluzione di LiAlH4 è stata aggiunta a goccia
a una velocità tale da mantenere una temperatura inferiore a 20 °C. Dopo l'aggiunta, il bagno di acqua e ghiaccio è stato rimosso e la miscela è stata agitata per 30 minuti.
La soluzione giallo chiaro è stata riscaldata a riflusso (80 °C) con un mantello riscaldante e ha assunto un colore avorio dopo 3 ore.
solidi gialli sui lati del pallone a fondo tondo.
Fase 2C. Il mantello riscaldante è stato rimosso e il matraccio è stato lasciato raffreddare a 50 °C. Il matraccio è stato nuovamente
raffreddato a 20 °C. La reazione è stata spenta con l'aggiunta sequenziale di 3 gocce di NaOH 1 M e 3 gocce di H2O deionizzata. La miscela
è stata diluita con THF (500 mL) e agitata per 20 minuti. La miscela è stata filtrata tramite imbuto di Büchner e il filtrato è stato mantenuto sotto N2.
Il panello filtrato è stato rapidamente rilavorato con 200 mL di [soluzione al 10% di (7% di ammoniaca in MeOH) in CH2Cl2] e THF (500 mL). I filtrati sono stati
sono stati combinati e concentrati per ottenere un solido verde. Il solido è stato triturato con EtOAc/ettano 1:1 (50 mL), quindi filtrato tramite imbuto di Büchner.
imbuto di Büchner. Il solido verde scuro è stato essiccato in forno a 40 °C per una notte per fornire la psilocina secca (7) come solido verde scuro; resa: 20,7
g (91%); mp 167-169 °C.
La psilocina è stata sintetizzata.
Parte II: Sviluppo del cerotto transdermico di psilocina e studio in vitro (ATTENZIONE: VEDRAI DELLA FLESSIONE UMANA FRESCA, È ORRIBILE).
Sciogliendo la psilocina in una miscela proprietaria di polimeri acrilati (in eptano), colo la soluzione in una linea di rilascio e uso un coltello da colata per ottenere uno strato adesivo di 100 um. Una volta asciugato, applico lo strato di supporto e formo un cerotto di 1 cm^2 . Questo cerotto viene utilizzato per lo studio in vitro.
La foto seguente è un'istantanea dell'apparato di diffusione (il cerotto sopra la pelle con l'acqua che scorre sotto).
Spero che vi piaccia!
La pubblicazione seguente, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization, approfondisce la questione. Quando il dimero si forma, non è rilevabile tramite analisi HPLC e ATR-FTIR, il che è strano. Questo dà ai gruppi di ricerca falsi positivi per la purezza della psilocina. Ho trovato un modo per stabilizzare la psilocina nel cerotto.
Comunque, cominciamo! Ho fatto ogni passo da solo, con l'assistenza del mio compagno che è un ingegnere chimico. Questo accadeva quando avevo una licenza DEA di tipo 1 e 3 non solo per la ricerca, ma anche per la produzione.
Parte I (sintesi della psilocina)
fase 1: sintesi del 3-[2-(Dimetilammino)-2-ossoacetil]-1H-indolo-4-il acetato
1a. Un pallone da 2000 mL, a quattro colli, a fondo tondo, è stato equipaggiato con un agitatore in testa, un regolatore di temperatura J-Kem, un imbuto di caduta da 250 mL e un setto di gomma attraverso il quale è stata inserita una pressione positiva di N2 secco. Il setto è stato rimosso e il matraccio è stato caricato equamente con 1H-indol-4-il acetato (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 equiv.)
e Et2O anidra (700 mL). Il matraccio è stato richiuso con il setto e lavato con N2. La sospensione è stata agitata per 10 minuti e poi
raffreddata a 0 °C in un bagno di acqua e ghiaccio per 30 minuti.
1b. L'imbuto di gocciolamento è stato caricato con una soluzione di cloruro di ossalile (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 equiv.) in Et2O (60 mL). La soluzione di cloruro di ossalile è stata aggiunta per caduta a una velocità sufficiente a mantenere la temperatura a 5 °C o inferiore, per minimizzare la formazione di dimeri e altri possibili sottoprodotti. Man mano che l'aggiunta procedeva, si formava uno slurry giallo di 10. Una volta completata l'aggiunta, la miscela è stata agitata per 4 ore.
1c. Dopo questo tempo, è stato aggiunto eptano (400 mL) e la miscela è stata agitata per 30 minuti a 0 °C. Il solido giallo ottenuto è stato rapidamente filtrato. Il solido giallo ottenuto è stato rapidamente filtrato e risciacquato successivamente con eptano (2 × 300 mL), che è stato rapidamente utilizzato nella fase successiva. . Una soluzione 2,0 M di dimetilammina in THF (175 mL) è stata aggiunta a goccia a goccia a una velocità sufficiente a mantenere la temperatura sotto i 5 °C per minimizzare le reazioni collaterali. Dopo che l'aggiunta è stata
aggiunta, è stata aggiunta a goccia a goccia piridina (46 mL) in THF (100 mL) e la miscela è stata agitata bene per 60 minuti. È stato aggiunto eptano (600 mL) e il contenuto del pallone è stato filtrato per aspirazione tramite un imbuto di Büchner. Il residuo filtrato è stato trasferito in un pallone a fondo tondo e aggiunto di H2O deionizzata (1000 mL), agitato per 30 min e filtrato tramite imbuto di Büchner. Il solido bianco sporco è stato triturato in sequenza per 40 min in EtOAc (600 mL) ed eptano (400mL). Lo slurry è stato filtrato tramite imbuto di Büchner e il solido è stato essiccato in forno a 40 °C per una notte per ottenere 6 come solido giallo chiaro; resa: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
L'ATR-FTIR ha confermato la sintesi del 3-[2-(Dimetilammino)-2-ossoacetil]-1H-indolo-4-il acetato. Questo composto può essere conservato a 4°C per diversi mesi!
Fase 2: Sintesi della psilocina
Fase 2A: Un pallone da 2000 mL, a quattro colli e a fondo tondo, è stato equipaggiato con un agitatore in testa, un regolatore di temperatura J-Kem, un imbuto di gocciolamento da 250 mL e una valvola di sicurezza.
250 mL e un setto di gomma attraverso il quale è stata inserita una pressione positiva di N2 secco. Il setto è stato rimosso e il
setto è stato rimosso e il matraccio è stato caricato in sequenza con acetato di 3-[2-(dimetilammino)-2-ossoacetil]-1H-indolo-4-il (6; 31,5 g, 115 mmol) e 2-CH3-THF (1000
mL). Il matraccio è stato immerso in un bagno di ghiaccio a 0 °C e una soluzione di 2,3 M di LiAlH4 in 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) è stata aggiunta attraverso l'imbuto gocciolatore da 250 mL.
l'imbuto di gocciolamento da 250 mL. L'imbuto di gocciolamento è stato risciacquato con ulteriore 2-CH3-THF (20 mL). La soluzione di LiAlH4 è stata aggiunta a goccia
a una velocità tale da mantenere una temperatura inferiore a 20 °C. Dopo l'aggiunta, il bagno di acqua e ghiaccio è stato rimosso e la miscela è stata agitata per 30 minuti.
La soluzione giallo chiaro è stata riscaldata a riflusso (80 °C) con un mantello riscaldante e ha assunto un colore avorio dopo 3 ore.
solidi gialli sui lati del pallone a fondo tondo.
Fase 2C. Il mantello riscaldante è stato rimosso e il matraccio è stato lasciato raffreddare a 50 °C. Il matraccio è stato nuovamente
raffreddato a 20 °C. La reazione è stata spenta con l'aggiunta sequenziale di 3 gocce di NaOH 1 M e 3 gocce di H2O deionizzata. La miscela
è stata diluita con THF (500 mL) e agitata per 20 minuti. La miscela è stata filtrata tramite imbuto di Büchner e il filtrato è stato mantenuto sotto N2.
Il panello filtrato è stato rapidamente rilavorato con 200 mL di [soluzione al 10% di (7% di ammoniaca in MeOH) in CH2Cl2] e THF (500 mL). I filtrati sono stati
sono stati combinati e concentrati per ottenere un solido verde. Il solido è stato triturato con EtOAc/ettano 1:1 (50 mL), quindi filtrato tramite imbuto di Büchner.
imbuto di Büchner. Il solido verde scuro è stato essiccato in forno a 40 °C per una notte per fornire la psilocina secca (7) come solido verde scuro; resa: 20,7
g (91%); mp 167-169 °C.
La psilocina è stata sintetizzata.
Parte II: Sviluppo del cerotto transdermico di psilocina e studio in vitro (ATTENZIONE: VEDRAI DELLA FLESSIONE UMANA FRESCA, È ORRIBILE).
Sciogliendo la psilocina in una miscela proprietaria di polimeri acrilati (in eptano), colo la soluzione in una linea di rilascio e uso un coltello da colata per ottenere uno strato adesivo di 100 um. Una volta asciugato, applico lo strato di supporto e formo un cerotto di 1 cm^2 . Questo cerotto viene utilizzato per lo studio in vitro.
La foto seguente è un'istantanea dell'apparato di diffusione (il cerotto sopra la pelle con l'acqua che scorre sotto).
Spero che vi piaccia!
